本公司提供的15% SDS-PAGE彩色凝胶超快速制备试剂盒，分A液与B液，制胶方便快捷，上样孔明显，至少可制备50块常规大小的15% SDS-PAGE凝胶，可用于Western Blot实验。本试剂盒提供的上层胶（浓缩胶）试剂可配置成彩色上层胶，上样孔清晰可见，可轻松上样。该染料对电泳和检测结果无影响。下层胶（分离胶）为无色透明凝胶，与上层胶分界明显易切割。实际配置的凝胶数量与选择的制胶厚度有关。

试剂盒组成：

成分	规格
上层胶溶液A	50mL
上层胶溶液B	50mL
15%下层胶溶液A	125mL
15%下层胶溶液B	125mL
AP(过硫酸铵)	500mgX2支

操作步骤：

根据所要检测的目的蛋白分子大小选择合适下层胶（分离胶）浓度试剂盒，15% SDS-PAGE彩色凝胶超快速制备试剂盒检测的最佳蛋白分子大小为<40KDa，其它分子大小可参考下表：

SDS-PAGE下层胶浓度	最佳蛋白分子大小（KDa）
6%	50-250
8%	30-130
10%	20-100
12%	10-60
15%	<40

2、准备好制胶器并组装好制胶玻璃板。

3、取一管500mg的AP粉末加到5mL纯水中溶解配置成10%AP溶液备用。AP溶液容易失效，4℃避光保存一周有效，分装后-20℃保存一年内有效。

4、根据制胶数量分别取适量体积的下层胶溶液A和下层胶溶液B（1:1比例）等体积混匀配置成下层胶准备液，可4℃放置，一天内使用。灌下层胶前按照10%AP溶液：下层胶准备液=1:100的比例加入10%AP溶液，混匀后立即进行灌胶，然后沿制胶玻璃板缓慢移动并加入纯水封住下层胶排除气泡。室温平稳静置30分钟后下层胶完全凝固。例如 5mL下层胶溶液A和5mL下层胶溶液B混匀后加入100uL10%AP溶液。

5、等待下层胶凝固的过程中可以配置上层胶。据制胶数量分别取适量体积的上层胶溶液A和上层胶溶液B（1:1比例）等体积混匀配置成上层胶准备液（为彩色液体），可4℃放置，一天内使用。

6、待下层胶完全凝固后弃去纯水。灌上层胶前按照10%AP溶液：上层胶准备液=1:100的比例加入10%AP溶液，混匀后立即进行灌胶并快速插好合适的制胶梳子。室温平稳静置30分钟后上层胶完全凝固，缓慢拔出制胶梳子。

7、如果当天不使用，可是在拔掉梳子后用湿润的纸巾包住保持湿度，装入自封袋中，4℃保存一周内可以使用。

注意事项：

1、本试剂盒中所有试剂在使用前请先颠倒混匀，低温保存可能会出现固体结晶，需37℃复温完全溶解后使用。

2、本试剂盒中AP为粉末，需用纯水配制成10%浓度。取一支500mg AP粉末加入5mL纯水即可，配制成的溶液放4℃保存，一周有效，-20℃分装保存一年。

3、凝胶必需充分凝固后方可使用；上层胶在室温条件下5分钟开始凝固，需要及时插梳子，若插梳子时上层胶为凝胶状则为制胶失败。

4、温度较低时，下层胶和上层胶凝固时间会延长，可移至37℃恒温箱中等待凝固。温度较高时，下层胶和上层胶凝固时间会缩短，可将下层胶准备液与上层胶准备液先4℃放置后灌胶。

5、为了您的健康和安全，在实验操作时请穿实验服并戴好一次性手套。

温馨提示：

使用前请详细阅读使用说明书，在有效期内使用，并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。