免疫组化双标
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免疫组化双标

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  • 产品价格: 50.00
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  • 品牌名称: 博尔夫生物

服务介绍

用标记的特异性抗体,对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量,进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。本项目为免疫组化双标实验,可直接在组织切片、细胞涂片或培养细胞爬片上原位显示某些蛋白质或多肽类物质,并可精确到亚细胞结构水平,可以在同一张切片上检测两种不同的抗原。

主要用途:

免疫组织化学技术可借助显微镜的显像与放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、酶、激素、病原体及受体等),并对其进行定位、定性及定量的研究。在病理学中,免疫组化技术常用来进行肿瘤的诊断及鉴别诊断,也可通过此技术对肿瘤进行更细化的分类。可以在同一张切片上检测两种不同的抗原。

 

检测原理:

基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原。

实验流程:

脱蜡与水化-抗原修复-灭活内源性过氧化物酶和生物素-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAB显色-洗脱-抗原修复-灭活内源性过氧化物酶和生物素-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-TY试剂-红色显色-苏木素复染-脱水与透明-封片-显微镜镜检。

 

样本要求及运输条件:

1提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。

2、提供编号清晰的蜡块或蜡头。

3、石蜡切片常温运输,冰冻切片-80℃保存干冰运输。

4、涂片和爬片必须充分固定,常温运输。

 

注意事项:

1、客户提供的抗体,要求先做预实验,除了正式实验样本外,需客户提供预实验样本(预期高表达,蜡块和切片皆可)和阳性对照。

2、抗体:一般指一抗(客户检测目的蛋白),需要客户提供准确的抗体名称、品牌货号,根据抗体货号可以确认抗体的应用(检测种属和检测方式)是否符合基本要求,否则存在风险,具体以预实验为准。接收抗体时,需确认抗体体积与保存温度,建议至少10μl,多余可返还。二抗由我司提供,若客户提供特殊来源的一抗(如:绵羊来源),需客户提供相应二抗。

3、预实验确认效果后,再做正式实验。预实验结果由客户自行确认,我司可协助推荐,但不对最终结果作保证,预实验与正式实验间隔周期不要太久,建议3周内反馈。

4、同一个抗体用于不同种属、不同脏器,都需做预实验确认。

5、正式实验的趋势我司不做保证。

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