硝酸银(Von-kossa)染色是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙便为银所置换,银在光的作用下(如太阳光或紫外光)被还原为黑色的金属银。
主要用途:
主要用于组织学钙盐染色,可用以观察组织中钙的分布和钙含量多少的检测。
结果判读:
钙盐呈褐黑至深黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色。
实验流程:
脱蜡至水-硝酸银液作用-蒸馏水洗-硫代硫酸钠液处理-水洗-苏木素染色-分化与水洗-伊红染色-脱水与透明-封片-显微镜镜检。
样本要求及运输条件:
1、提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2、涂片和爬片必须充分固定。
3、石蜡切片常温保存运输,冰冻切片-80℃保存干冰运输。
注意事项:
1、硝酸银在染色前,切片必须用蒸馏水洗干净。
2、硝酸银液必须在染色前现配。
3、染色所用的器皿必须用蒸馏水洗干净。
4、硝酸银液的浓度为0.5-5%均可,采用1%的浓度,主要取决于暴光的亮度和时间,若暴露于强阳光下,需15分钟已足够,若暴露于紫外灯下,5-10分钟即可。