服务介绍
试剂组成 | 规格 |
| 250ml |
| 25mg |
| 5ml |
| 20ml |
运输与储存:
常温运输,蛋白标准品(BSA)2-8℃保存,有效期1年。配置成蛋白标准溶液后需要-20℃保存,并在6个月之内使用。
操作步骤:
1、配置蛋白标准储备液:取1ml蛋白标准配制液到蛋白标准品(BSA)管中,将25mg蛋白标准品完全溶解,即得到浓度为25mg/ml的蛋白标准贮存液。此溶液可-20℃长期保存。
2、蛋白标准工作液:取两支1.5ml离心管,分别标注为1,2。分别加入900ulPBS稀释液,然后取蛋白标准储备液100ul加入至1中混匀,从1中取100ul加入至2中混匀。2即为蛋白标准工作液,浓度为0.25mg/ml。
3、绘制标准曲线:将蛋白标准工作液分别按0、1、2、4、8、16、20ul加入到96孔板中,然后用PBS稀释液将每孔补足为20ul(也可以先加入对应体积的PBS稀释液,再加蛋白标准工作液,终体积为20ul即可)。得到蛋白浓度依次为0、12.5、25、50、100、200、250ug/ml。
4、将待测的蛋白样品进行适当稀释(使用PBS稀释液进行稀释),然后每个样本取20ul加入96孔板中。
5、检测:向以上每孔加200ul考马斯亮蓝G250溶液充分混匀,放置于室温反应3-5min,以标准曲线0作参照,在595nm波长下比色测定,记录各孔吸光值。
6、计算:以标准曲线样品浓度与吸光值绘制标准曲线,根据所测样品的吸光值代入标准曲线公式中计算出待测样品浓度。
注意事项:
考马斯亮蓝G250使用前需恢复至室温,摇一摇瓶身。避免影响检测灵敏度。
蛋白标准品请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的标准。
温馨提示:
使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
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