服务介绍
试剂组成 | 规格 |
BCA-试剂A | 100ml |
BCA-试剂B | 3ml |
BSA蛋白标准品 | 2*25mg |
蛋白标准配置液 | 10ml |
PBS稀释液 | 20ml |
运输与储存：
2-8℃，1年有效。
操作步骤：
①取一只BSA蛋白标准品，加入1ml蛋白标准配置液，完全溶解，即25mg/ml的蛋白标准储备液，放置于-20℃可长期保存
②蛋白标准工作液：取两支1.5ml离心管，分别标注为1，2。分别加入900ulPBS稀释液，然后取蛋白标准储备液100ul加入至1中混匀，从1中取100ul加入至2中混匀。2即为蛋白标准工作液，浓度为0.25mg/ml。
③绘制标准曲线：将蛋白标准工作液分别按0、1、2、4、8、16、20ul加入到96孔板中，然后用PBS稀释液将每孔补足为20ul（也可以先加入对应体积的PBS稀释液，再加蛋白标准工作液，终体积为20ul即可），得到蛋白浓度依次为0、12.5、25、50、100、200、250ug/ml。
④将待测的蛋白样品进行适当稀释（使用PBS稀释液进行稀释），然后每个样本取20ul加入96孔板中。
⑤配制BCA显色工作液：将BCA-A试剂与BCA-B试剂按50：1体积比充分混合均匀，得到BCA显色工作液（根据样本数量配置）。可室温保存，24小时内使用。
⑥向标准曲线样品孔和待测样品孔中每孔加入200ul BCA显色工作液，充分混匀，37℃反应30min后，以标准曲线0作为参照，在562nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。（室温下反应2小时，60℃反应30min，如果蛋白浓度较低，建议置于60℃反应）
⑦计算：以标准曲线样品浓度与吸光值绘制标准曲线。根据所测样品的吸光值带入标准曲线公式中计算出待测样品浓度。
温馨提示：
使用前请详细阅读使用说明书，在有效期内使用，并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
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