IP裂解液说明书
产品名称:
IP裂解液
产品货号:
BF0005
产品包装规格:
IP裂解液(100ml)
产品简介:
IP细胞裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。该产品裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,IP和co-IP。
IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris (pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。用该产品裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,所以不能用Bradford法测定该产品裂解得到样品的蛋白浓度。
使用说明:
对于培养细胞样品:
1、取适量的IP裂解液加入PMSF,使PMSF的终浓度为1mM,放置数分钟。
2、贴壁细胞:去除培养基,PBS清洗一遍,6孔板每孔加入100-200ulIP裂解液(以次比例类推),用移液器反复吹打几次,使裂解液与细胞充分接触。裂解数秒即可。
3、悬浮细胞:离心收集细胞,去上清,按6孔板每孔加入100-200ulIP裂解液的比例加入,颠倒混匀,充分裂解。
4、充分裂解后,10000--14000g离心3-5min,取上清,即可进行后续的实验。
对于组织样品:
1、取适量的IP裂解液加入PMSF,使PMSF的终浓度为1mM,放置数分钟。
2、将组织剪碎成,加入适量配制好的IP裂解液(按每20mg加入100-200ul裂解液的比例)。
3、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
4、充分裂解后,10000--14000g离心3-5min,取上清,即可进行后续的实验。
注意事项:
1、尽量避免反复冻融,影响效果,可以适当分装后使用。
2、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3、可能需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。
保存条件:
2-8℃保存,1年有效。
温馨提示:
使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。