服务介绍
成分 | 规格 |
上层胶溶液A | 50mL |
上层胶溶液B | 50mL |
8%下层胶溶液A | 125mL |
8%下层胶溶液B | 125mL |
AP(过硫酸铵) | 500mgX2支 |
操作步骤:
- 根据所要检测的目的蛋白分子大小选择合适下层胶(分离胶)浓度试剂盒,8% SDS-PAGE彩色凝胶超快速制备试剂盒检测的最佳蛋白分子大小为30KDa-130KDa,其它分子大小可参考下表:
SDS-PAGE下层胶浓度 | 最佳蛋白分子大小(KDa) |
6% | 50-250 |
8% | 30-130 |
10% | 20-100 |
12% | 10-60 |
15% | <40 |
2、准备好制胶器并组装好制胶玻璃板。
3、取一管500mg的AP粉末加到5mL纯水中溶解配置成10%AP溶液备用。AP溶液容易失效,4℃避光保存一周有效,分装后-20℃保存一年内有效。
4、根据制胶数量分别取适量体积的下层胶溶液A和下层胶溶液B(1:1比例)等体积混匀配置成下层胶准备液,可4℃放置,一天内使用。灌下层胶前按照10%AP溶液:下层胶准备液=1:100的比例加入10%AP溶液,混匀后立即进行灌胶,然后沿制胶玻璃板缓慢移动并加入纯水封住下层胶排除气泡。室温平稳静置30分钟后下层胶完全凝固。例如 5mL下层胶溶液A和5mL下层胶溶液B混匀后加入100uL10%AP溶液。
5、等待下层胶凝固的过程中可以配置上层胶。据制胶数量分别取适量体积的上层胶溶液A和上层胶溶液B(1:1比例)等体积混匀配置成上层胶准备液(为彩色液体),可4℃放置,一天内使用。
6、待下层胶完全凝固后弃去纯水。灌上层胶前按照10%AP溶液:上层胶准备液=1:100的比例加入10%AP溶液,混匀后立即进行灌胶并快速插好合适的制胶梳子。室温平稳静置30分钟后上层胶完全凝固,缓慢拔出制胶梳子。
7、如果当天不使用,可是在拔掉梳子后用湿润的纸巾包住保持湿度,装入自封袋中,4℃保存 一周内可以使用。
注意事项:
1、本试剂盒中所有试剂在使用前请先颠倒混匀,低温保存可能会出现固体结晶,需37℃复温完全溶解后使用。
2、本试剂盒中AP为粉末,需用纯水配制成10%浓度。取一支500mg AP粉末加入5mL纯水即可,配制成的溶液放4℃保存,一周有效,-20℃分装保存一年。
3、凝胶必需充分凝固后方可使用;上层胶在室温条件下5分钟开始凝固,需要及时插梳子,若插梳子时上层胶为凝胶状则为制胶失败。
4、温度较低时,下层胶和上层胶凝固时间会延长,可移至37℃恒温箱中等待凝固。温度较高时,下层胶和上层胶凝固时间会缩短,可将下层胶准备液与上层胶准备液先4℃放置后灌胶。
5、为了您的健康和安全,在实验操作时请穿实验服并戴好一次性手套。
温馨提示:
使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
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