超敏ECL显色试剂盒说明书
产品名称:
超敏ECL显色试剂盒
产品货号:
BF0030
产品包装规格:
超敏ECL-A液(60ml/100ml) 超敏ECL-B液(60ml/100ml)
产品简介:
超敏ECL化学发光底物是基于Luminol的新一代增强型化学发光底物试剂,可与HRP标记的二抗催化发生化学反应发出荧光,通过化学发光成像仪或X光片压片呈现荧光强弱。
使用方法:
1、按常规Western blot实验步骤孵育一抗,二抗(HRP标记的二抗),洗膜。
2、最后一次洗膜时可以配制超敏ECL工作液:分别取等体积的A和B混合均匀(吸取A后换吸头再吸取B,以免污染,根据膜的大小配制),工作液配制好后需尽快使用,放置时间长会降低灵敏度。
3、最后一次洗膜后,用镊子取出膜,用滤纸吸去多余的洗涤液(注意不要接触膜的蛋白面),然后置于洁净保鲜膜上或塑料容器内。
4、在膜上滴加配制好的超敏ECL工作液,确保工作液均匀覆盖在膜上,避光孵育1-3min。
5、用滤纸吸掉多余的工作液,随后进行压片检测或化学发光成像检测。
6、压片:将膜固定于X光胶片暗盒内(蛋白面朝上),暗房内曝光X胶片,显影冲洗。
7、化学发光成像仪检测:将膜放置到化学发光成像仪内,参考仪器说明进行检测。
注意事项:
1、配好的工作液暴露于强光下较长时间会降低灵敏度。
2、长时间曝光会加深背景,使条带强弱趋势不明显,曝光不足条带会比较模糊。
3、由于该试剂盒极其灵敏,建议按照推荐比例稀释抗体,抗体浓度过高会容易出现背景。
4、叠氮钠可以抑制HRP,所以不要使用叠氮钠作为防腐剂。
保存条件:
2-8℃避光保存,1年有效,若长期不用,可放-20℃保存更长时间。
温馨提示:
使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。