蛋白质印迹法（免疫印迹实验）即 Western Blot 。 是一种常用的蛋白质检测技术，其基本原理是蛋白的印迹技术，即把目的蛋白质从复杂的样本中分离出来，并转移到固相支持物上，再与特异性抗体结合，通过 ECL 发光液显色，检测样本目的蛋白的表达，并能对蛋白进行定性和半定量分析。
主要用途： Western blot 检测的主要用途包括检测和定量细胞或组织中特定蛋白质的表达水平、分析蛋白质的修饰和变化、研究蛋白质之间的相互作用。 Western blot 技术是一种重要的蛋白质分析工具，具有高灵敏度、高特异性和高分辨率等优点，在生物医学研究中发挥着重要的作用。它通过一系列的步骤来实现对特定蛋白质的检测和分析。
检测步骤： 蛋白质的提取与分离 ：首先，从细胞或组织样品中提取目标蛋白质，通过 SDS-PAGE 进行电泳分离，根据蛋白质的分子量大小进行分离。 蛋白质的转移 ：将分离后的蛋白质从凝胶转移到聚丙烯酰胺膜（如PVDF 或硝酸纤维素膜）上，这一步骤称为电转移，通常通过将凝胶和膜浸泡在缓冲液中，并施加电流使蛋白质迁移至膜上。
膜上蛋白质的定位 ：使用特异性抗体与膜上的蛋白质进行特异性反应。首先，膜经过预处理以减少非特异性结合，然后与特异性的一抗结合，再与特异性的二抗结合，形成免疫复合物。
信号的检测与显色 ：标记有荧光物质、放射性或酶（如辣根过氧化物酶）的二抗与特异性一抗结合的位置进行标记。酶类辅助物质可以产生颜色或荧光，使膜上的特异性蛋白质位置可视化。
数据分析 ：通过定量或半定量分析成像结果，测量目标蛋白质的数量或相对表达水平。Western blot 方法的前提是已知蛋白质的抗体信息，因此以此为基础进行蛋白质的检测、表达水平的分析等。这种方法对于研究蛋白质的功能具有重要意义。
服务流程： 1 、接收干冰样本及抗体，实验室有常备抗体指标，需额外收取抗体费。
2 、提取蛋白，检测样本内参，确定样本蛋白是否降解。
3 、正式实验， 5-10 个工作日内完成。
4 、出具实验报告，提供原始扫描图片。
样本要求及运输条件： 可接收的样本包括：提取蛋白样本、细胞样本、组织样本、其他。
1 、客户提供已经提取好的蛋白样本：
（ 1 ）蛋白保存完好：蛋白提取后保存于 -80 ℃或者液氮。
（ 2 ）提取过程中加入合适蛋白酶抑制剂。
（ 3 ）干冰运输。
2 、客户提供细胞样本：
（ 1 ）收集细胞沉淀，细胞数量大于 1 × 106 。
贴壁细胞：用细胞刮将细胞小心刮下来，将细胞悬液 1000rpm ，离心 5 分钟。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。
悬浮细胞：细胞悬液 1000rpm ，离心 5 分钟。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。
（ 2 ）每组细胞数量尽量大于 106 ，如果指标较多，需提供更多细胞量。
（ 3 ）干冰运输。
3 、客户提供组织样本：
（ 1 ）组织保存完好：保存于 -80 ℃或者液氮。
（ 2 ）组织重量要求大于 50mg ， 如果检测指标较多，需提供更多组织。
（ 3 ）尽量清洗掉血液，应剔除除目的组织以外的部分。
（ 4 ）干冰运输。
