利用细胞膜具有通透性的特点,用染料DMAO和PI联合使用检测细胞的死活。DMAO染料具有膜通透性,能透过细胞膜,优先结合双链DNA。PI是一种非渗透性荧光染料,不能穿过具有生物活性的细胞质膜,因此对于具有完整细胞膜的细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,PI可进入细胞核并与双链DNA结合,并嵌入细胞的DNA双螺旋形成PI-DNA复合物从而产生红色荧光。具有完整细胞膜的活细胞呈现绿色荧光,细胞膜受损的死细胞同时呈现绿色与红色荧光。
服务流程:
1、提供详细实验方案。
2、接收样本。
3、培养传代细胞。
4、细胞计数,接种细胞。
5、根据实验要求干预处理细胞。
6、染色。
7、细胞拍照分析。
样本要求及运输条件:
1、客户提供细胞样本:
(1)传代培养的细胞,需告知细胞名称、培养条件等基本信息,无细胞名称的细胞将不提供冻存服务,无培养条件的细胞将无法提供及时的传代培养等操作。
(2)寄送冻存细胞需用充足干冰保存运输。
(3)寄送培养细胞需拧紧培养瓶(不透气瓶盖),装满培养基,封口膜封好,常温运输,严禁冰冻。
(4)细胞状态以收到细胞后的观察状态为准。
2、客户提供实验中的相关试剂:
(1)提供试剂货号、保质期、保存条件等基本信息。
(2)配制好的试剂需提供名称、浓度、安全性等信息。
(3)不接收具传染性的样本、试剂药物等等;不接收有生物危害的样本;不接收有致病性的样本。