服务介绍
试剂组成 | 主要成分 |
A.缓冲液(20ml/100ml) | 醋酸钠 |
B. 亚硝酸钠溶液(1ml/5ml) | 亚硝酸钠 |
C. 副品红溶液(1ml/5ml) | 副品红 |
D. AS-BI磷酸盐底物溶液(1ml/5ml) | 萘酚AS-BI磷酸盐 |
Mayer苏木素染液(20ml/100ml) | 苏木素 |
注:需自备无水乙醇、二甲苯、中性树胶等。 | |
工作液配置步骤:
1、取B液50ul与C液50ul在离心管混合均匀,为副品红溶液。
2、在上述100ul副品红溶液中加入100ul D溶液,混合均匀。
3、取A液1.8ml于上述混合液中,充分混匀。
4、强光照射,直至工作液变红色可用。
备注:务必按照所属顺序配制工作液。注意工作液为现配现用,避免浪费。
染色步骤:
1、石蜡切片常规脱蜡至水(冰冻切片省略这步)。
2、切片于纯水洗5分钟。
3、用组化笔在切片组织上画圈后,置于盛有纯水的湿盒中,用纯水37℃孵育2h。
4、倒去组织上纯水后,切片重新放入湿盒,滴加现配过滤好的trap工作液完全覆盖于切片组织上,放于37℃烤箱避光染色20-30 min。
5、倾去染液,水轻洗玻片。
6、Mayer苏木素染液液滴染(浸染)1-2min,水洗。(此步骤为染核,可自选)。
7、切片经3缸无水乙醇,每缸5min → 直接放入 2缸二甲苯,每缸5min透明后,滴加中性树胶封片剂封片。
结果判读:
破骨细胞呈酒红色,细胞核呈蓝色。
图例:
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本图仅供参考,实际染色效果会因样品、检测条件的不同而存在差异。 | ||
注意事项:
- trap工作液为现配现用,提前估计好每次用量。
- 副品红溶液开瓶后两个月内为最佳使用期。
保存条件:
2-8℃避光保存,1年有效。
温馨提示:
使用前请详细阅读使用说明书,在有效期内使用,并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
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