骨组织由黏多糖和蛋白纤维构成的有机质及沉积于其中的无机盐组成，无机盐主要是羟基磷灰石结晶，其中大部分为磷酸钙和碳酸钙。由于骨的特殊构成，使其质地较硬，较难直接制片，因此必须对其进行脱钙处理。用化学或物理方法，从有机胶原基质、钙化软骨和周围组织中去除无机钙的过程称为脱钙。本项目采用EDTA对骨组织进行脱钙，EDTA是一种良好的脱钙螯合剂，它对组织和抗原破坏极小，不产生气泡，不影响染色，但脱钙速度较慢。若加温至37℃，配合摇床，可加快脱钙速度。厚度5mm骨组织脱钙时间为7-21天。
优点：
1、对组织的结构和抗原损害小。
2、经EDTA脱钙的组织染色结果好。
3、用化学方法测试可以确定脱钙终点。
缺点：
1、脱钙速度慢，不适合较大标本脱钙使用。
2、脱钙后组织会稍稍变硬。
服务流程：
骨组织取材-固定-组织脱钙-水洗-脱水透明-浸蜡-包埋-切片。
样本要求：
1、骨组织取材尽量去除皮肤和肌肉，以便脱钙液与骨组织充分接触，加快脱钙。
2、样本放置于10-15倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。
3、固定液可多不可少；常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻；切勿固定时间过长。
脱钙周期：
骨骼位置 | 小鼠脱钙周期/天 | 大鼠脱钙周期/天 | 兔子脱钙周期/天 |
股骨 | 3-5天 | 2-3周 | 2-3个月 |
胫骨 | 3-5天 | 2-3周 | 2-3个月 |
尺桡骨 | 3-5天 | 2-3周 | |
肱骨 | 3-5天 | 2-3周 | |
肘关节 | 3-5天 | 3-4周 | |
肩关节 | 3-5天 | 3-4周 | |
膝关节 | 3-5天 | 3-4周 | 3个月以上 |
踝关节 | 5-7天 | 4-5周 | 3个月以上 |
鼻腔 | 5-7天 | 2-3周 | |
颅骨 | 3-5天 | 2-3周 | |
耳蜗 | 3-5天 | 2-3周 | |
牙齿 | 3-5天 | 3-4周 | 3个月以上 |
脊柱 | 3-5天 | 3-4周 | 3个月以上 |
尾椎 | 5-7天 | 3-4周 | |
