高尔基染色法自1873年由意大利人卡米洛·高尔基发表以来,已成为研究神经组织的重要手段,被广泛应用于生物学、医学等领域。
Golgi-Cox浸染法是研究神经元和胶质细胞正常和非正常形态最有效的方法之一。使用Golgi技术,在药物处理过的动物脑中发现了神经树突和树突微小的形态改变。
主要用途:
主要用于染神经细胞的轴索树状突起。神经细胞的轴索树状突起被染成黑色,便于观察其结构。
检验原理:
高尔基染色法是一种重要的细胞染色技术,其原理基于重铬酸钾与硝酸银反应生成黑色的铬酸银沉淀,这种沉淀因组织的嗜银性而沉积于神经元中,从而使神经细胞的轴索或树状突起染成黑色,便于观察其构造。
实验流程:
动物麻醉后剥取新鲜脑或脊髓组织使用通用型固定液固定—高尔基染色—切片—封片—全景扫描。
结果判读:
神经元细胞,神经树突棘呈黑色,背景浅黄色。
样本要求及运输条件:
- 实验动物处死前,对实验动物进行深度麻醉,尽快从颅骨中剥离完整的脑组织,操作时须注意不要损伤或压迫组织。
2、小鼠脑组织经蒸馏水快速洗去表面的血液后直接放入通用性固定液中;对于较大的样本,例如大鼠脑组织,需用锋利的刀片切取目的区域,切成5-10mm厚的组织块(建议冠状切面),将需要观察的组织块经蒸馏水快速漂洗去除血液后,放入通用性固定液中。
注意:
1、为确保染色效果,每瓶内只能放入一个样本,不能放入多个或多块组织。
2、取材后旋紧瓶盖,防止漏液,减少晃动。
3、取材固定后请尽快送样。