PAS(Periodic Acid-Schiff)染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。
检测原理:
高碘酸是一种氧化剂,能破坏多糖类结构的碳键。组织切片首先被高碘酸溶液氧化,使存在组织内多糖分子的乙二醇基或氨羟基的碳键打开,生成醛类化合物,随后,暴露出来的游离醛基与Schiff氏液的无色品红结合,生成新的红色至紫红色复合物而得到定位,定位于胞浆上。
主要用途:
一般用来显示糖元和其它多糖物质的染色。鉴定肝糖原、肌糖原,观察某些在肝、肾、肺、心肌、肠上的代谢疾病。
结果判读:
糖原、中性粘液物质、软骨基质、植物的真菌和细胞壁、上皮的基膜等均呈紫红色,细胞核浅蓝色。
实验流程:
脱蜡至水-高碘酸氧化-水洗-雪夫试剂染色-水洗-苏木素染核-分化-脱水透明-封片-显微镜镜检。
样本要求及运输条件:
1、提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
- 涂片和爬片必须充分固定。
- 石蜡切片常温保存运输,冰冻切片-80℃保存干冰运输。
注意事项:
1、雪夫试剂临用前半小时取出恢复室温,溶液中出现淡红色时不能使用。
2、雪夫试剂染色的时间随室温而定,夏季室温高,作用10分钟已足够;冬季室温低,可延长至20分钟左右。
3、雪夫试剂染色后,一定需要自来水冲洗。