含铁血黄素( Hemosiderin )是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。普鲁士蓝反应( Prussian blue reaction )又称含铁血黄素染色,即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞或间质内。
检测原理: 在酸性条件下,亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁氰化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物。
主要用途: 普鲁士蓝染色主要用于显示细胞中有无铁离子存在,以及铁离子存在的位置及含量,常见于吞噬细胞内,可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。
结果判读: 铁离子,含铁血黄素呈蓝色,细胞核呈红色。
实验流程: 脱蜡至水 - 普鲁士蓝染色 - 水洗 - 核固红复染 - 水洗 - 脱水透明 - 封片 - 显微镜镜检。
样本要求及运输条件: 1 、 提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的 10-15 倍,固定时间建议 24-48h ,大标本固定 12h ,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温( 24 ℃左右)或冷藏( 4 ℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2 、提供编号清晰的蜡块或蜡头。
3 、石蜡切片常温运输,冰冻切片 -80 ℃保存干冰运输。
4 、涂片和爬片必须充分固定,常温运输。
注意事项: 1 、组织应采用中性福尔马林固定。
2 、盐酸用分析纯较好。
3 、在整个操作过程中容器要干净,避免使用铁制工具。
4 、铁反应前的各个步骤应以蒸馏水冲洗,以防止自来水内的铁离子与组织内的钙盐结合产生假阳性反应。