六胺银染色中,肾小球囊基膜、肾小管上皮基膜、真菌、弹性纤维和网状纤维都呈黑色,背景为红色。可用于观察真菌的存在与否。
检测原理:
霉菌的基本结构成分含有较多的黏多糖和蛋白质。六胺银染色的方法是利用铬酸氧化真菌内黏多糖化合物而暴露出醛基,醛基还原六胺银液成为黑色的金属银,染色效果易于观察。
主要用途:
六胺银色常用于真菌染色。在染肾组织切片时观察膜性肾病基底膜的钉突形成、淀粉样变性肾病基底膜的双轨和多轨改变,是其他染色不可替代的。
结果判读:
肾小球囊基底膜和肾毛细血管球基底膜和肾小管上皮基膜呈黑色,背景粉红色或橘红色。其他组织、霉菌、弹力纤维及一些网状纤维也呈棕黑色。
实验流程:
脱蜡至水-高碘酸氧化-水洗-工作液预热-六胺银染色-水洗-硫代硫酸钠处理-水洗-伊红复染-脱水与透明-封片-显微镜镜检。
样本要求及运输条件:
1、提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2、提供编号清晰的蜡块或蜡头。
3、石蜡切片常温运输,冰冻切片-80℃保存干冰运输。
4、涂片和爬片必须充分固定,常温运输。
注意事项:
1、工作液不能重复使用,现配现用。
2、工作液于65℃烘箱作用2小时,水浴锅或烘箱均可。
3、此法是进行性银浸染,肾小管基底膜一般比肾血管基底膜显色早,但应以后者作为观察标准,血管球基底膜呈黑色而背景呈黄棕色为宜。
4、本法所用的器皿,应预先用清洁液浸泡过,并冲洗干净。用后也应用清洁液浸洗。