TUNEL检测是一种用于检测细胞凋亡（程序性细胞死亡）的方法。它利用一种特殊的酶称为末端脱氧核苷酸转移酶（TdT），该酶能够在DNA链断裂的末端附着，并将标记有特定标记物的dUTP加到DNA的末端。标记物可以是荧光染料、辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)等。
主要用途：
主要用途在一张芯片上同时检测细胞凋亡和目的蛋白。
检测原理：
TUNEL检测基于细胞凋亡中染色体DNA的断裂过程，这是一种渐进的分阶段过程，其中染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为较大片段，随后在Ca2+和Mg2+依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成特定长度的DNA片段。这些断裂的DNA末端（3’-OH末端）可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’-末端，从而可以进行凋亡细胞的检测。这种方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）。
实验流程：
石蜡切片脱蜡至水-Proteinase K处理-PBS洗涤-TUNEL Dilution Buffer孵育-TUNEL reaction mixture孵育-PBS洗涤-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAPI染核-PBS洗涤-封片-显微镜镜检。
样本要求及运输条件：
1、提供固定完全的组织样本。组织离体后，选择合适的固定液和容器立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，固定时间建议24-48h，大标本固定12h，再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。
2、提供编号清晰的组织芯片蜡块。
3、组织芯片石蜡切片常温运输。
注意事项：
- 任何实验方法都存在局限性，根据TUNEL实验的本质问题，公司不能保证结果中凋亡细胞的多少（即假阳性、或偏阴性结果）。
2、TUNEL+IF染色建议先做预实验（预实验由客户提供预期高表达的样本，蜡块或切片皆可），确认效果后，再做正式实验。预实验结果优先由客户自行确认，预实验和正式实验间隔周期不要太久，建议连续三周内完成。
3、正式实验的趋势我司不做保证。
