组织芯片免疫荧光单标
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组织芯片免疫荧光单标

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  • 品牌名称: 博尔夫生物

服务介绍

免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是在免疫学、生物化学与显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称为荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法,称为荧光抗原法。这两种方法总称为免疫荧光技术。但实际工作中荧光抗原技术应用很少,所以常将荧光抗体技术称为免疫荧光技术。

在一张组织芯片上对一个抗原进行标记,即为组织芯片免疫荧光IF单标。通常可标记红光或绿光,细胞核用DAPI标记为荧光蓝色。组织芯片免疫荧光可以将数十至上百个小组织整齐地排列在一张载玻片上进行染色,使芯片上的组织样本实验条件保持一致、节省时间、节省试剂,扫描后便于统一分析。相对单张染色时间和成本都可降低,缺点是选取的组织面积比较小,不能全面的体现个体样本的表达情况。组织芯片免疫荧光流程与常规组织免疫荧光流程基本一致,但样本比较珍贵,操作流程更加严格。

 

主要用途:

免疫荧光染色及成像分析是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术,广泛应用于临床病理和医学及生物学研究的各个领域。

检测原理:

免疫荧光检查的原理主要是将免疫学方法与荧光标记技术结合,检查特异蛋白抗原在组织或细胞内的分布。由于荧光素所发出的荧光可以在荧光显微镜下检出,因此可以对抗原进行细胞定位、定性和定量分析。免疫荧光检测的方法一般可分为直接法,间接法,夹心法等。

实验流程:

脱蜡与水化-抗原修复-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAPI染核-封片-显微镜镜检

 

样本要求及运输条件:

1提供固定完全的组织样本。组织离体后,选择合适的固定液和容器立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,固定时间建议24-48h,大标本固定12h,再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。

2、提供编号清晰的芯片蜡块。

3、组织芯片石蜡切片常温运输。

 

注意事项:

  1. 先做单个样本的预实验,客户提供,按切片数量计费(费用同常规免疫荧光),以便确定抗体最佳浓度和染色效果。
  2. 抗体效果及浓度确认后,用预实验芯片染色(预实验芯片由客户提供),参考预实验普通切片的条件来进行免疫荧光染色。若客户没有,可以不做。

3、若客户提供一抗,需告知准确的抗体名称、品牌货号,根据抗体货号可以确认抗体的应用(检测种属和检测方式)是否符合基本要求,否则存在风险,具体以预实验为准。接收抗体时,需确认抗体体积与保存温度,建议至少10μl,多余可返还。二抗由我司提供,若客户提供特殊来源的一抗(如:绵羊来源),需客户提供相应二抗。

4、预实验确认效果后,再做正式实验。预实验结果由客户自行确认,我司可协助推荐,但不对最终结果作保证,预实验与正式实验间隔周期不要太久,建议3周内反馈。

5、预实验普通切片、预实验芯片和正式实验芯片,最好是同一类型组织,即与客户提供正式实验芯片的组织类型一致。组织芯片建议扫描。正式实验趋势我司不做保证。

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