免疫荧光技术（immunofluorescence technique）是在免疫学、生物化学与显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称为荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法，称为荧光抗原法。这两种方法总称为免疫荧光技术。但实际工作中荧光抗原技术应用很少，所以常将荧光抗体技术称为免疫荧光技术。
在一张切片上同时对四个抗原进行标记，即为免疫荧光IF四标，可直接在组织切片、细胞涂片或培养细胞爬片上原位显示某些蛋白质或多肽类物质，不同的一抗标记不同颜色荧光，通常可标记红光、绿光、粉色或金色，细胞核用DAPI标记为荧光蓝色，可用于定位四种不同抗原。
主要用途：
免疫荧光染色及成像分析是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术，广泛应用于临床病理和医学及生物学研究的各个领域。免疫荧光双标可用于两种不同抗原的定性、定位及定量分析。
检测原理：
免疫荧光检查的原理主要是将免疫学方法与荧光标记技术结合，检查特异蛋白抗原在组织或细胞内的分布。由于荧光素所发出的荧光可以在荧光显微镜下检出，因此可以对抗原进行细胞定位、定性和定量分析。免疫荧光检测的方法一般可分为直接法，间接法，夹心法等。
实验流程：
脱蜡与水化-抗原修复-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAPI染核-封片-显微镜镜检
样本要求及运输条件：
1、提供固定完全的组织样本。组织离体后，选择合适的固定液和容器立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，固定时间建议24-48h，大标本固定12h，再切开固定。固定完全后尽快送检。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。
2、提供编号清晰的蜡块或蜡头。
3、石蜡切片常温运输，冰冻切片-80℃保存干冰运输。
4、涂片和爬片必须充分固定，常温运输。
注意事项：
1、客户提供的抗体，要求先做预实验，除了正式实验样本外，需客户提供预实验样本（预期高表达，蜡块和切片皆可）和阳性对照。
2、抗体：一般指一抗（客户检测目的蛋白），需要客户提供准确的抗体名称、品牌货号，根据抗体货号可以确认抗体的应用（检测种属和检测方式）是否符合基本要求，否则存在风险，具体以预实验为准。接收抗体时，需确认抗体体积与保存温度，建议至少10μl，多余可返还。二抗由我司提供，若客户提供特殊来源的一抗（如：绵羊来源），需客户提供相应二抗。
3、预实验确认效果后，再做正式实验。预实验结果由客户自行确认，我司可协助推荐，但不对最终结果作保证，预实验与正式实验间隔周期不要太久，建议3周内反馈。
4、同一个抗体用于不同种属、不同脏器，都需做预实验确认。
5、正式实验的趋势我司不做保证。
6、IF三标及以上只能做荧光扫描，不能做荧光拍照。
