本项目是利用荧光探针DHE(Dihydroethidium)进行活性氧检测,可以用于各种真核培养细胞及组织冰冻切片的检测。在激发波长535nm,发射波长610nm附近,使用荧光显微镜、激发共聚焦显微镜等检测荧光,从而测定细胞内活性氧的水平。
主要用途:
测定组织或培养活细胞内活性氧水平。
实验流程:
冰冻切片复温-DHE染色-TBST洗涤-DAPI染核-封片-显微镜镜检
样本要求及运输条件:
- 提供新鲜冻存组织干冰运输。
- 提供新鲜组织冰冻切片-80℃保存,干冰运输。
- 培养好的细胞-80℃保存,干冰运输。
注意事项:
1、DHE在光照和空气中易被氧化,注意避光密封保存。
2、DHE染色结果易淬灭,染色完成后应尽快镜检采图,以减少各种可能的误差。
3、DHE染色必须使用未固定的新鲜组织冰冻切片或活细胞进行染色。
4、荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。