扫描电镜(SEM)是一种利用电子束扫描样品表面并收集样品发出的物理信号来获取表面形貌信息的显微技术。扫描电镜的高分辨率和深度信息使其成为一种重要的研究工具,能够提供关于样品表面的详细信息,对于理解和分析材料的性质、生物样本的微观结构以及地质样本的矿物组成等方面具有不可替代的作用。
主要用途:
1、三维形貌的观察和分析。
2、观察形貌的同时,进行微区的成分分析。
主要设备及参数:
1、平台主要设备:扫描电镜 tescan,VEGA 3 LMU。
2、扫描电镜 tescan,VEGA 3 LMU 主要技术指标:
(1)二次电子分辨率:高真空(二次电子3.0nm at 30kV,8.0nm at 3kV)、低真空(低真空二次电子):3.5nm at 30kV。
(2)放大倍数:2.5-1000,000。
(3)加速电压:0.2-30kV。
检测原理:
扫描电子显微镜电子枪发射出的电子束经过聚焦后汇聚成点光源;点光源在加速电压下形成高能电子束;高能电子束经由两个电磁透镜被聚焦成直径微小的光点,在透过最后一级带有扫描线圈的电磁透镜后,电子束以光栅状扫描的方式逐点轰击到样品表面,同时激发出不同深度的电子信号。此时,电子信号会被样品上方不同信号接收器的探头接收,通过放大器同步传送到电脑显示屏,形成实时成像记录。由入射电子轰击样品表面激发出来的电子信号有:俄歇电子(Au E)、二次电子(SE)、背散射电子(BSE)、X射线(特征X射线、连续X射线)、阴极荧光(CL)、吸收电子(AE)和透射电子。每种电子信号的用途因作用深度而异。
服务流程:
1、接受样本、核对编号,沟通切面及拍照位置和倍数要求。
3、随机挑选两个样本做预实验,如客户有指定预实验编号需提前告知。
4、正式实验待客户反馈后做完。
样本取材要求:
动植物组织取材流程及要求:
1、1-3分钟内取样,组织块不超过3mm2,用PBS漂洗去除样本表面的血污,去掉毛发等。将需要扫描的面做好标记(如在对面进行剪角处理)。
2、取材时避免镊子挤压造成机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。尤其是注意保护扫描面。
3、组织取下后立即放入电镜固定液内室温固定2小时,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。
4、植物样本放入固定液后需抽气沉底。
细胞样本取材流程及要求:
1、贴壁细胞:细胞必须贴壁于盖玻片上制成爬片,弃培养基,用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温固定2小时,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。
2、悬浮细胞:离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀米粒大小,弃培养基后用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液,细胞必须吹散悬浮于固定液内,室温固定2小时,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。
细菌样本取材流程及要求:
1、固体培养基的细菌:细菌必须贴壁于盖玻片上制成爬片,用盖玻片轻轻覆盖在菌落上,在培养箱培养一晚上,第二天轻轻揭下来,放入固定液中室温固定2小时,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。
2、悬浮细菌孢子等:离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀芝麻至绿豆大小,弃培养基后用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液,必须吹散悬浮于固定液内,室温固定2小时,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。
其他材料:
直接干燥运输,带有磁性的金属材料不能做扫描电镜。